• 酶聯免疫檢測試劑盒代測實驗常見問題及解答

    Q1:ELISA代測需要用到的儀器A1:ELISA代測需要儀器如下:1、酶標儀Microplate reader 廠家:Biotek; 型號:ELx8082、恒溫箱Incubator 廠家:sanyo; 型號:MIR-2623、洗板機Microplate Washer廠家:北京拓撲分析儀器有限公司; 型號:DEM-3型Q2:不知道如何完成標曲擬合和樣本測算?需要用到什么軟件。A2:用EXCEL軟件即可完成樣本的測算。其中雙抗夾心試劑盒參看雙抗夾心ELISA試劑盒標曲擬合及樣本測方法,而競爭抑制試劑盒參看競爭抑制ELISA試劑盒標曲擬合及樣本測算方法。Q3:用于ELISA檢測的樣本制備方法和保存方法。A3:ELISA檢測的常......

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  • 流式細胞術(FCM)常見問題及解答

    FCM是利用流式細胞儀對處在快速直線流動狀態中的單列細胞或生物顆粒進行逐個、多參數、快速的定性、定量分析或分析技術。然而,在FCM的實際應用過程中,要想得到高質量的流式數據卻并非易事?,F就FCM實驗中的常見問題進行分析,希望能幫助相關實驗人員提高實驗成功率。1. 怎么選擇合適的對照?1)同型對照:使用同型抗體做平行實驗,主要目的是消除抗體與樣本的非特異性結合。2)陰性細胞對照:使用已知的不表達目標抗原的細胞做平行實驗,主要目的是消除抗體的非特異性結合。3)二抗對照:第二抗體多為熒光標記的多抗,非特異性結......

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  • ELISA實驗樣本測值低原因分析和建議解決方案

    ELISA實驗樣本測值低原因分析和建議解決方案ELISA 實驗中,實驗者經常會遇到樣本測值低的問題,針對這一問題,分析了可能原因和解決方法。分析原因解決方法試劑盒保存不當,導致試劑部分或完全失效。請按說明書要求保存試劑盒。檢測液 A、檢測液 B、標準品以及酶標條等儲存在-20 oC,而其它試劑需儲存在 4 oC。樣本反復凍融,樣本反復凍融會導致樣本中蛋白降解。收集樣本制備后,需進行分裝后凍存-20oC或-80oC,避免樣本反復凍融。樣本保存不當或保存時間過長。長時間的儲存有可能導致目標蛋白的降解, 致使檢測結果不理想。建議使......

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  • 蛋白質印跡(WB)常見問題及解答

    蛋白質印跡(Western Blot)是根據抗原抗體特異性結合的原理檢測復雜樣本中的某種蛋白的方法。將混合抗原樣本在凝膠板上進行單向或雙向電泳,經過 PAGE 分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與或標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術廣泛應用于鑒定蛋白以及對蛋白進行定性和半定量分析。蛋白質印跡分為蛋白質分離、......

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  • 免疫組織化學(IHC)常見問題及解答

    免疫組織化學技術又稱免疫細胞化學技術,是指用標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項免疫檢測方法。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性和分子生物技術的敏感性等巧妙結合,借助顯微鏡的顯像和放大作用,在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(如蛋白質、多肽、酶、激素、病原體以及受體等),是單一的靜止的形態學描述,上升到結構、功能和代謝為一體的動態觀察,為疾病的診斷、鑒別診斷和發病機制的研究提供了強有力的手段。然而,要想得到一張高質......

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  • 酶聯免疫吸附測定實驗(ELISA)實驗常見問題及解答

    在酶聯免疫吸附測定實驗中,每一個步驟或環節都需要操作者嚴格控制實驗條件,否則可能會影響到最終結果?,F就試驗中遇到得常見問題進行分析總結,給進一步給出解決方案,希望能為幫助相關實驗人員提供實驗成功率。問題可能原因解決方案標準曲線差標準品準備不正確進行正確的標準品梯度稀釋吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不精確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不精確檢查......

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